Rakan yang melakukan eksperimen berkaitan sel mesti selalu menggunakan kaedah pembekuan sel. Ringkasnya, penyimpanan beku sel adalah untuk menyelamatkan sel dalam persekitaran suhu rendah untuk mencapai tujuan pemeliharaan jangka panjang. Sel akan mempunyai tahap mutasi tertentu semasa proses penghantaran. Untuk memastikan sel masih boleh digunakan dalam kes pencemaran dan mutasi sel, sesetengah sel biasanya digunakan untuk pembekuan.
Prinsip pembekuan sel
Satu prinsip dalam proses pembekuan dan pemulihan sel ialah "percantuman beku perlahan" untuk menyelamatkan daya hidup sel secara maksimum. Ringkasnya, ia perlu perlahan apabila dibekukan dan disejukkan, dan ia perlu dipanaskan dengan cepat apabila pulih daripada suhu rendah. Sebab pembekuan perlahan ialah jika sel diletakkan terus dalam persekitaran suhu ultra rendah seperti nitrogen cecair, sel-sel membentuk kristal ais yang besar, yang akan merosakkan sel.
Jika anda membekukannya dengan perlahan, sel-sel boleh dehidrasi perlahan-lahan untuk mencapai tujuan melindungi sel. Di samping itu, apabila pulih, ia juga untuk mengelakkan hablur ais kecil daripada membentuk hablur ais yang besar, iaitu hablur berat hablur ais. Oleh itu, apabila setiap orang biasanya melakukan pembekuan sel, ia sentiasa menyebabkan sel mengalami kerugian, yang berkemungkinan memberi kesan dalam langkah pembekuan.
Beberapa kaedah pembekuan sel
Kaedah manual: Sel beku biasanya disimpan dalam nitrogen cecair. Kaedah operasi manual adalah untuk menyejukkan kecerunan di dalam peti sejuk. Simpan sel dalam tiub storan beku dan letakkannya dalam persekitaran peti sejuk 4 darjah C, -20 darjah C, -80 darjah C mengikut urutan. Dibekukan selama 24 jam pada -80 darjah C sebelum dipindahkan ke nitrogen cecair. Penyejukan manual tidak memerlukan tambahan tambahan bahan habis pakai lain. Ia boleh dikendalikan secara manual. Ia adalah yang paling mudah, tetapi ia tidak mudah. Operasi sebenar menyusahkan. Dan kesannya tidak begitu baik, kerana kaedah penyejukan ini masih tidak seragam, dan ia tidak semestinya terpakai untuk sel yang lebih rapuh.
Kotak penyejukan kecerunan : Kotak penyejukan kecerunan yang dijual di pasaran digunakan khas dalam penyejukan seragam proses pembekuan. Kelajuan penyejukan biasanya -1 darjah /minit. Letakkan tiub storan beku ke dalam kotak penyejuk kecerunan dan letakkan kotak penyejuk kecerunan terus dalam persekitaran peti sejuk -80 darjah C untuk bermalam tanpa operasi kecerunan manual. Kemudian turunkan tiub depositori dan masukkan ke dalam nitrogen cecair. Kesan menggunakan kotak penyejukan kecerunan adalah lebih baik, kerana kotak penyejukan komersial di pasaran boleh memastikan kadar penyejukan yang seragam secara kasar.
Terdapat dua kotak penyejukan kecerunan biasa di pasaran. Keperluan untuk menambah isopropil, biasanya badan kotak PC. Apabila digunakan, tambahkan isopenol pada garis penskala dalam kotak apabila menggunakannya. Isopropanol digunakan sebagai pembawa untuk penyimpanan dan pengedaran haba.
Satu lagi jenis tidak perlu ditambah dengan isopropil, berbuih, dan peti sejuk boleh diletakkan terus semasa digunakan, yang lebih mudah untuk dikendalikan.
Kotak penyejuk isopropanol disyorkan untuk menggantikan cecair selepas menggunakannya beberapa kali, tetapi kerana isopropanol adalah cecair berbahaya, yang menyebabkan kemudaratan kepada eksperimen dan alam sekitar, ia biasanya boleh digunakan beberapa kali. Walau bagaimanapun, adalah perlu untuk memastikan bahawa cecair berada dalam jumlah tertentu.
Storan beku tidak diprogramkan: Gunakan cecair beku bukan program yang boleh dibeli di pasaran. Berbanding dengan cecair beku tradisional, komponen dalaman boleh mengurangkan kerosakan pada sel-sel kristal ais, supaya tidak perlu menggunakan kecerunan untuk menyejukkan, dan juga tidak memerlukan kotak penyejukan kecerunan. Storan beku boleh diletakkan terus dalam persekitaran peti sejuk -80 darjah C.
Banyak sampel sel sangat berharga. Selain kita, kita mesti menggunakannya semasa melakukan eksperimen. Anda juga perlu memilih produk yang bagus sebanyak mungkin dalam pemilihan produk yang berkaitan. Pilih tiub storan beku dengan kualiti yang layak, cuba gunakan alat penyejukan kecerunan untuk pembekuan, dan maksimumkan jaminan kerosakan rendah pada sel untuk mengelakkan kehilangan kecil akibat kecil.
